Wir haben die aufregendsten neuen Forschungen auf dem Gebiet der Genetik und Zellforschung der letzten Woche zusammengestellt.<\/p>\n\n
Hintergrund<\/p>\n\n
Atherosklerose ist eine h\u00e4ufige Begleiterkrankung von Diabetes mellitus Typ 2. Die Rekrutierung von Monozyten durch ein aktiviertes Endothel und die pro-inflammatorische Aktivit\u00e4t der daraus resultierenden Makrophagen sind entscheidende Komponenten der Atherosklerose. Der exosomale Transfer von microRNAs hat sich als parakriner Signalmechanismus herausgestellt, der die Entwicklung atherosklerotischer Plaques reguliert. Die microRNAs-221 und -222 (miR-221\/222) sind in vaskul\u00e4ren glatten Muskelzellen (VSMCs) von Diabetikern erh\u00f6ht. Wir stellten die Hypothese auf, dass die \u00dcbertragung von miR-221\/222 \u00fcber VSMC-abgeleitete Exosomen aus diabetischen Quellen (DVEs) eine erh\u00f6hte vaskul\u00e4re Entz\u00fcndung und die Entwicklung atherosklerotischer Plaques f\u00f6rdert. <\/p>\n\n
Methoden<\/p>\n\n
Die Exosomen wurden aus VSMCs gewonnen, nachdem sie mit nicht zielgerichteter oder miR-221\/-222 siRNA (-KD) exponiert worden waren. Sie wurden aus diabetischen (DVEs) und nicht-diabetischen (NVEs) Quellen isoliert und ihr miR-221\/-222-Gehalt wurde mittels digitaler Tr\u00f6pfchen-PCR (ddPCR) gemessen. Die Expression von Adh\u00e4sionsmolek\u00fclen und die Adh\u00e4sion von Monozyten wurde nach der Exposition gegen\u00fcber DVEs und NVEs gemessen. Der Makrophagen-Ph\u00e4notyp nach Exposition gegen\u00fcber DVEs wurde durch Messung von mRNA-Markern und sezernierten Zytokinen bestimmt. Altersgleiche M\u00e4use mit Apolipoprotein-E-Mangel (ApoE-\/-) wurden 6 Wochen lang mit einer westlichen Di\u00e4t ern\u00e4hrt und erhielten jeden zweiten Tag Injektionen von Kochsalzl\u00f6sung, NVEs, NVE-KDs, DVEs oder DVE-KDs. Die Bildung von atherosklerotischen Plaques wurde mit Hilfe der Oil Red Oil-F\u00e4rbung gemessen. <\/p>\n\n
Ergebnisse<\/p>\n\n
Die Exposition menschlicher Nabelvenen- und Koronararterien-Endothelzellen gegen\u00fcber DVEs, aber nicht NVEs, NVE-KDs oder DVE-KDs, f\u00f6rderte eine erh\u00f6hte Expression des interzellul\u00e4ren Adh\u00e4sionsmolek\u00fcls-1 und die Adh\u00e4sion von Monozyten. DVEs, aber nicht NVEs, NVE-KDs oder DVE-KDs f\u00f6rderten auch die pro-inflammatorische Polarisierung menschlicher Monozyten in einer miR-221\/222 abh\u00e4ngigen Weise. Schlie\u00dflich f\u00fchrte die intraven\u00f6se Verabreichung von DVEs, aber nicht von NVEs, zu einem signifikanten Anstieg der atherosklerotischen Plaqueentwicklung. <\/p>\n\n
Fazit<\/p>\n\n
Diese Daten identifizieren einen neuartigen parakrinen Signalweg, der die kardiovaskul\u00e4ren Komplikationen des Diabetes mellitus f\u00f6rdert.<\/p>\n\n
Vollst\u00e4ndigen Artikel lesen<\/u><\/a><\/p>\n\n Exosomen sind neue interzellul\u00e4re Kommunikatoren, die f\u00fcr die zellul\u00e4re Hom\u00f6ostase w\u00e4hrend der Entwicklung und Differenzierung wichtig sind. Die Dysregulation der durch Exosomen vermittelten Kommunikation ver\u00e4ndert die zellul\u00e4re Vernetzung und f\u00fchrt zu Entwicklungsst\u00f6rungen und chronischen Krankheiten. Exosomen sind von Natur aus heterogen, da sie sich in ihrer Gr\u00f6\u00dfe, der H\u00e4ufigkeit von Membranproteinen und der unterschiedlichen Ladung unterscheiden. In dieser \u00dcbersichtsarbeit haben wir die neuesten Entwicklungen bei der Biogenese von Exosomen, der Heterogenit\u00e4t und der selektiven Anreicherung verschiedener exosomaler Ladungen wie Proteine, Nukleins\u00e4uren und mitochondrialer DNA beleuchtet. Dar\u00fcber hinaus wurden auch die j\u00fcngsten Entwicklungen bei den Isolierungstechniken von Exosomen-Subpopulationen er\u00f6rtert. Das umfassende Wissen \u00fcber die Heterogenit\u00e4t der extrazellul\u00e4ren Vesikel und die selektive Anreicherung der Ladung bei bestimmten Krankheiten kann einen Hinweis auf den Schweregrad der Erkrankung und die M\u00f6glichkeiten einer fr\u00fchen Prognose geben. Die Freisetzung spezifischer Exosomen-Subtypen wird mit dem Fortschreiten bestimmter Krankheitstypen in Verbindung gebracht und ist daher ein wahrscheinliches Werkzeug f\u00fcr die Entwicklung von Therapeutika und Biomarkern. Dieser Artikel ist durch Copyright gesch\u00fctzt. Alle Rechte vorbehalten. <\/p>\n\n Vollst\u00e4ndigen Artikel lesen<\/u><\/a><\/p>\n\n Die Ultrafiltration mit tangentialem Fluss (TF-UF) ist ein effizientes Verfahren zur Isolierung von Milchexosomen ohne morphologische Deformation. Der TF-UF-Ansatz mit Mikro-Ultrafiltrations-SiNx-Membranfiltern<\/em> leidet jedoch unter der Verstopfung und dem Fouling der Poren der Mikro-Ultrafiltrations-Membranfilter mit gro\u00dfen Biopartikeln. Daher ist sie f\u00fcr die langfristige, kontinuierliche Isolierung gro\u00dfer Mengen von Exosomen nur begrenzt geeignet. <\/p>\n\nTragen unterschiedliche Wege der Exosomen-Biogenese und die selektive Anreicherung von Ladungen zur exosomalen Heterogenit\u00e4t bei?<\/strong><\/h2>\n\n
Isolierung von Rindermilchexosomen mittels elektrophoretischer Oszillationsunterst\u00fctzung durch Tangentialflussfiltration<\/strong><\/h2>\n\n